應用案例|奧譜天成ATF4500熒光分光光度法在藥材方面的應用

熒光分光光度法廣泛應用于藥材研究

前言

當今社會隨著群眾思想的轉變，中藥逐漸又成為了大眾熱點。目前中藥市場魚龍混雜，假中藥、劣質藥層出不窮。中藥市場中藥質量評價和質量控制是保證中藥有效性、安全性的手段，也是一直困擾中藥現代化發展的瓶頸。首先，中藥的質量受多環節多因素影響。中藥材種類繁多、產地分散，加上生長環境、采收季節、炮制工藝等因素，造成所含化學成分的差異。

隨著中醫藥事業的不斷發展，熒光分析法在中藥材鑒別上的優勢逐漸顯現，中藥材中含有多種具有熒光特性的化學物質，如環狀化合物、芳香化合物等，葉類藥材因在采收、加工、運輸、儲存的過程中較易皺縮破碎，性狀鑒別較為困難；又因葉類藥材含有較多的鞣質、葉綠素等成分，一般理化鑒別也較為困難。可以通過熒光法簡便快速鑒別。

二、熒光分光光度法鑒別番瀉葉藥材和大青葉藥材

番瀉葉是一種常見的導瀉劑，被廣泛運用于各種茶飲。其來源多為進口，國內產量較少，導致偽劣品泛濫。大青葉目前應用混亂，市場上的品質良莠不齊。且隨著大青葉被北京市藥品監督管理局列為預防甲型H1N1的藥物之列，大青葉的用量劇增，市面上出現大量偽品混淆使用的現象。

王鑫瑞等人通過對番瀉葉和大青葉粉碎，加入水、稀乙醇、甲醇、稀鹽酸、氫氧化鈉溶液，經過超聲和離心，獲得浸出液。通過查閱資料后將激發波長設置為254nm和365nm

圖一二大青葉不同溶劑超聲激發波長254nm熒光光譜

番瀉葉不同溶劑超聲激發波254nm熒光光譜

圖三四大青葉不同溶劑超聲激發波長365nm熒光光譜

番瀉葉不同溶劑超聲激發波長365nm熒光光譜

本研究發現，兩種藥材的浸出液經熒光分光光度計可得到不同的圖譜。激發波長254nm時，大青葉水、鹽酸浸出液有兩個熒光峰，番瀉葉均只有一個熒光峰；激發波長為365nm時，番瀉葉甲醇、氫氧化鈉、乙醇浸出液有兩個熒光峰，大青葉均只有一個熒光峰。且大青葉熒光峰強度明顯強于番瀉葉。

三、熒光分光光度法測定枸杞中核黃素濃度

核黃素又稱維生素B2，英國化學家布魯斯首先從乳清中發現的。核黃素是維持機體正常的必需營養物質，具有多種生理功能，能促進多種有機物的代謝，促進機體生長發育，它參與體內蛋白質、脂肪和碳水化合物的代謝，還與動物視覺有關，是動物必需的營養物質。當今社會最廣泛用來測定核黃素濃度的方法是熒光分光光度法，熒光法利用核黃素在pH4～9的環境下，激發波長在440～500nm的范圍內產生黃綠色熒光，且該熒光強度與核黃素濃度成正比的原理對核黃素進行測定熒光強度，方法操作簡單易行。

宋吉英等人通過對枸杞加入鹽酸溶液，經過離心之后取上層清液過濾。濾液倒入比色皿中，設置參數：

圖五 不同鹽酸溶液提取樣品的激發波長熒光強度

圖六 不同料液比提取樣品的激發波長熒光強度

圖七 不同攪拌時間提取樣品的激發波長熒光強度

通過不同對照組實驗，課題組獲得了**實驗條件，課題組準確稱取1.000g核黃素標品用0.5％的醋酸定容為1000ml做為母液，移取母液分別配制0.2，0.4，0.6，0.8，1μg/ml的核黃素標準溶液，以核黃素濃度為橫坐標，激發波長熒光強度為縱坐標，做標準工作曲線，所得標準曲線方程Ｆ＝15.998ｃ＋0.7684，Ｆ為熒光強度，ｃ為核黃素濃度，線性相關系數ｒ^２＝0.9993。

四、產品推薦

圖八 ATF4500 熒光分光光度計

1)綜合概述：熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定，不但可以做一般的定量分析，而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化，從而闡明分子結構與功能之間的關系。可以用于液體和固體樣品的掃描。

針對于隨著使用年限的增長，儀器燈源性能下降的問題，ATF4500采用性能優越的氙燈，同時改進了燈電源，光源亮度得到了提升，并有效延長氙燈的使用壽命至1000小時。延長燈泡更換周期可降低耗材成本，減輕燈泡更換等作業負擔。搭配上凝聚了奧譜天成長期發展的高超技術與全新科技，科學設計的光路系統，確保熒光分析所追求的優越精度與出類拔萃的測定精度，確保結果準確的同時，高速的三維熒光采集也能保證高速的掃描速度，不僅如此還有多種配件可供選擇，滿足用戶各種測定需求。

這款產品配置了奧譜天成特有的簡潔直觀的操作頁面，從用戶的角度出發，智能一體化的系統，只需稍微培訓，就能讓用戶快速上手。數據處理方面，可聯機通過譜圖處理來更好地整理數據。

2)產品選型

3)產品參數

參考文獻

王鑫瑞,馮帥,李峰.番瀉葉和大青葉藥材的熒光鑒別[J].山東中醫藥大學學報,2021,45(01):125-132.DOI:10.16294/j.cnki.1007-659x.2021.01.020

宋吉英.熒光分光光度法測定枸杞中核黃素含量[J].化學世界,2012,53(12):720-722.DOI:10.19500/j.cnki.0367-6358.2012.12.005